原代培养

Embryonic Spinal Motor Neurons培养

bluepig 的头像

我用得是E13的embryo 采用p75 low affinity ab来做panning纯化motor neurons...NB/B27培养
可是我发现纯化前的细胞种下去 第二天Isl1染色也有80%的阳性
我不知道这是假阳性 还是说 那个时候能在NB/B27里长的大多都是motor neuron 没什么inter neuron和sensory neuron
有人知道不?

原代培养神经细胞的胰酶消化问题?

libai 的头像

我是才做脑皮质神经元培养的,想请教一下各位我用0.025% ,5ml 的胰酶消化(一个乳大鼠),5分钟,同时轻轻吹打10下,再用5ml Hanks液终止,为什么总是消化过头了,把细胞消化没了(离心没有离下细胞,1200r/min, 8min)我以前没有用酶消化用这个速度和时间离心都能离下细胞。
我想问一下究竟是哪里出了问题,是不是胰酶的量太多了?
再问一下有时用酶消化的时候有全是胶冻状,也得不到细胞,这是不是胰酶加少了?

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